[자연과학] [생화학experiment(실험)] 단백질 정량 analysis - BCA법 & SDS-PAGE analysis …
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작성일 23-10-21 23:41
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실험과제/화학
설명
test(실험) 일시:
1. タイトル : 단백질 정량 分析(분석) BCA법 & SDS-PAGE 分析(분석) & Western Blot
2. test(실험) 목적
: BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 分析(분석)하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영동 결과를 觀察(관찰) 한 것을 바탕으로 Western Blot을 시행하여 membrane에 transfer시켜, 항원-항체 reaction response을 이용하여 특정한 단백질의 정량 分析(분석)과 검출하는 방법을 test(실험) 을 통해 숙지한다.3. theory(이론)
Ⅰ. 단백질 정량법1) BCA(Bicinchoninic Acid) 법
- 단백질이 구리 이온(Cu2+, Cu1+)을 환원 (Reduction) 시킬 수 있는 성질을 이용Fig 1. BCA 원리 모식도
- 단백질에 의해 환원된 구리 이온은 BCA용액과 reaction response을 해서 보라 빛의 화합물을 생성
- 이 화합물은 빛의 특정 영역(562nm)에서 구리 이온이 담긴 용액과 BCA용액 각각보다 빛의 흡수율이 높기에, spectrophotometer를 사용해서 측정(測定) 하면 흡수율 차이를 측정(測定) 할 수 있따
- 단백질의 양이 많으면 보다 많은 보라빛 화합물이 생성 → 그 화합물은 빛을 더 많이 흡수. 즉 흡수율이 증가 → 그것에 비례해서 Sample에…(省略)
2) Lowly assay(Folin-Ciocalteau)
3) Bradford assay
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